Test de cytotoxicité
Le test de cytotoxicité vérifie en laboratoire si une substance endommage ou tue des cellules vivantes en culture. Un résultat négatif exclut uniquement des lésions cellulaires aiguës dans ces conditions de test, pas la sécurité, la pureté, la stérilité ou l'identité du produit.
Aussi appelé: cytotoxicity testing
Le test de cytotoxicité est un essai de culture cellulaire in vitro qui expose des cellules de mammifères cultivées à une substance à tester ou à son extrait et compare la survie cellulaire à des témoins non traités. Il sert de dépistage précoce sensible et peu coûteux pour détecter des contaminants nocifs, mais ne constitue pas une preuve de sécurité. Il peut signaler des contaminants - y compris les solvants résiduels, les métaux lourds, les plastifiants, les agents de nettoyage ou les sous-produits de synthèse - même lorsque les analyses chimiques ne montrent aucun problème.
Procédure du test de cytotoxicité et seuil des 70 % selon l'ISO 10993-5
Le test de cytotoxicité est réalisé en exposant des cellules de mammifères cultivées - généralement des fibroblastes de souris L929 ou des lignées d'hépatomes humains comme HepG2 - à une substance à tester et en comparant la survie à des témoins non traités ; selon l'ISO 10993-5, une viabilité égale ou supérieure à 70 % de celle du témoin est classée comme non cytotoxique. La santé cellulaire est évaluée dans trois domaines : la morphologie (structure physique), la croissance et le métabolisme.
Méthodes validées courantes dans le test de cytotoxicité et ce que chacune mesure :
- MTT/XTT : mesure l'activité métabolique
- Test au rouge neutre : mesure la fonction lysosomale
- Libération de LDH : mesure les dommages membranaires
- Score qualitatif par microscopie
Limites du test de cytotoxicité et confusions courantes
Le test de cytotoxicité est un test de dépistage avec des limites claires : il ne peut pas confirmer l'identité ou la pureté, ne peut pas détecter une toxicité chronique ou spécifique à un organe, et ne peut pas détecter tous les contaminants. Il se distingue des tests de stérilité, des tests d'endotoxines ou de pyrogènes, et des tests de génotoxicité. Lors de l'examen d'un rapport de cytotoxicité, vérifiez la lignée cellulaire utilisée, la méthode appliquée, le pourcentage de viabilité et si le seuil de 70 % de l'ISO 10993-5 a été atteint.