ISO 10993-5
ISO 10993-5 é uma norma internacional para testes laboratoriais que avaliam se um material mata ou danifica células de mamíferos cultivadas em placa. Foi desenvolvida para dispositivos médicos e não testa pureza química ou identidade química.
Também chamado de: ISO 10993-5
A ISO 10993-5 faz parte da série ISO 10993. É um teste de citotoxicidade in vitro, ou seja, um ensaio laboratorial fora do organismo que verifica se um material, ou substâncias por ele liberadas, prejudica células cultivadas. É empregada como uma verificação precoce de segurança biológica antes do uso clínico.
O procedimento do teste ISO 10993-5 para viabilidade celular
O teste ISO 10993-5 geralmente inicia com um extrato do material de teste. Esse extrato é aplicado a células de mamíferos, comumente fibroblastos de camundongo L929, por 24 horas. O ensaio verifica se qualquer substância que lixivia do material danifica as estruturas celulares vivas.
De acordo com a norma, um material é considerado não citotóxico se a viabilidade celular permanecer acima de 70%. Caso a viabilidade caia abaixo desse limiar, o material é classificado como citotóxico, o que sinaliza um possível risco biológico.
Limitações e interpretações equivocadas da ISO 10993-5 para peptídeos
- Uma alegação de 'testado conforme ISO 10993-5' em um Certificado de Análise (CoA) de peptídeo pode ser enganosa porque a norma foi desenvolvida para dispositivos médicos, não para produtos químicos de pesquisa ou peptídeos.
- A ISO 10993-5 não comprova a identidade, sequência ou pureza química do peptídeo; ela apenas demonstra se a amostra testada causa morte celular.
- Um peptídeo pode ser aprovado no teste mesmo que seja a molécula incorreta ou contenha impurezas, desde que essas impurezas não sejam agudamente tóxicas para as células.
- A identidade e a pureza do peptídeo exigem métodos analíticos como Espectrometria de Massas (MS) para a sequência e HPLC para o nível de pureza.
- A ISO 10993-5 é uma norma de segurança biológica, não uma acreditação laboratorial como a ISO/IEC 17025; o FDA não aceita a ISO/IEC 17025 como substituta das Boas Práticas de Laboratório (GLP).
- Um estudo interlaboratorial de 2023 descobriu que especificações vagas da ISO 10993-5 podem levar a quase 50% de chance de diferentes laboratórios chegarem a conclusões conflitantes de citotoxicidade para o mesmo material.