ISO 10993-5
ISO 10993-5 es un estándar internacional para pruebas de laboratorio que determinan si un material mata o daña células de mamífero cultivadas en una placa. Fue desarrollado para dispositivos médicos y no evalúa la pureza química ni la identidad química.
También llamado: ISO 10993-5
ISO 10993-5 es parte de la serie ISO 10993. Es una prueba de citotoxicidad in vitro, es decir, un análisis de laboratorio fuera del cuerpo que verifica si un material, o las sustancias que libera, daña células cultivadas. Se utiliza como una verificación temprana de seguridad biológica antes del uso clínico.
El procedimiento de la prueba ISO 10993-5 para la viabilidad celular
La prueba ISO 10993-5 generalmente comienza con un extracto del material de prueba. Ese extracto se coloca sobre células de mamífero, comúnmente fibroblastos de ratón L929, durante 24 horas. La prueba verifica si cualquier sustancia que se filtra del material daña las estructuras celulares vivas.
Según la norma, un material se considera no citotóxico si la viabilidad celular se mantiene por encima del 70 %. Si la viabilidad cae por debajo de ese umbral, el material se clasifica como citotóxico, lo que indica un posible riesgo biológico.
Limitaciones y malinterpretaciones de la ISO 10993-5 para péptidos
- Una afirmación de 'probado según ISO 10993-5' en un Certificado de Análisis (CoA) de un péptido puede ser engañosa porque la norma fue desarrollada para dispositivos médicos, no para productos químicos de investigación o péptidos.
- La ISO 10993-5 no demuestra la identidad, la secuencia ni la pureza química del péptido; solo muestra si la muestra analizada mata células.
- Un péptido puede pasar la prueba incluso si es la molécula incorrecta o contiene impurezas, siempre que esas impurezas no sean agudamente tóxicas para las células.
- La identidad y pureza del péptido requieren métodos analíticos como la Espectrometría de Masas (MS) para la secuencia y la HPLC para el nivel de pureza.
- La ISO 10993-5 es un estándar de seguridad biológica, no una acreditación de laboratorio como la ISO/IEC 17025; la FDA no acepta la ISO/IEC 17025 como un reemplazo de las Buenas Prácticas de Laboratorio (GLP).
- Un estudio interlaboratorio de 2023 encontró que las especificaciones vagas de la ISO 10993-5 pueden llevar a casi un 50 % de probabilidad de que diferentes laboratorios lleguen a conclusiones de citotoxicidad contradictorias para el mismo material.