ISO 10993-5
ISO 10993-5 est une norme internationale pour les tests en laboratoire visant à déterminer si un matériau tue ou endommage des cellules de mammifères cultivées en boîte. Elle a été développée pour les dispositifs médicaux et ne teste ni la pureté chimique ni l'identité chimique.
Aussi appelé: ISO 10993-5
L'ISO 10993-5 fait partie de la série ISO 10993. Il s'agit d'un test de cytotoxicité in vitro, c'est-à-dire un test de laboratoire réalisé en dehors du corps qui vérifie si un matériau, ou des substances libérées par celui-ci, nuit à des cellules cultivées. Il est utilisé comme un contrôle précoce de sécurité biologique avant une utilisation clinique.
La procédure de test ISO 10993-5 pour la viabilité cellulaire
Le test ISO 10993-5 débute généralement par un extrait du matériau à examiner. Cet extrait est appliqué sur des cellules de mammifères, couramment des fibroblastes L929 de souris, pendant 24 heures. Le test évalue si des substances relarguées par le matériau endommagent les structures cellulaires vivantes.
Selon la norme, un matériau est considéré comme non cytotoxique si la viabilité cellulaire reste supérieure à 70 %. Si la viabilité descend en dessous de ce seuil, le matériau est classé comme cytotoxique, ce qui indique un risque biologique potentiel.
Limites et interprétations erronées de l'ISO 10993-5 pour les peptides
- Une mention 'testé ISO 10993-5' sur un certificat d'analyse (CoA) de peptide peut être trompeuse car la norme a été développée pour les dispositifs médicaux, pas pour les produits chimiques de recherche ou les peptides.
- L'ISO 10993-5 ne prouve pas l'identité, la séquence ou la pureté chimique d'un peptide ; elle montre seulement si l'échantillon testé tue les cellules.
- Un peptide peut réussir le test même s'il s'agit de la mauvaise molécule ou s'il contient des impuretés, tant que ces impuretés ne sont pas toxiques de manière aiguë pour les cellules.
- L'identité et la pureté d'un peptide nécessitent des méthodes analytiques telles que la spectrométrie de masse (MS) pour la séquence et la HPLC pour le niveau de pureté.
- L'ISO 10993-5 est une norme de sécurité biologique, pas une accréditation de laboratoire comme l'ISO/CEI 17025 ; la FDA n'accepte pas l'ISO/CEI 17025 comme remplacement des Bonnes Pratiques de Laboratoire (BPL).
- Une étude interlaboratoire de 2023 a révélé que des spécifications vagues de l'ISO 10993-5 peuvent conduire à près de 50 % de chances que différents laboratoires parviennent à des conclusions contradictoires sur la cytotoxicité pour le même matériau.