LC-MS
LC-MS (Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie) ist ein zweistufiger Labortest. Dabei wird ein Gemisch zunächst in einzelne Bestandteile getrennt; anschließend werden diese über die Messung ihrer genauen Molekülmasse identifiziert. Die Methode gilt als Goldstandard zur Prüfung der Identität und Reinheit einer Substanz.
Auch genannt: Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie, Liquid Chromatography-Mass Spectrometry, LC-HRMS, LC-MS/MS, High-Resolution LC-MS, triple-quadrupole LC-MS/MS, triple-quad, triple quadrupole, LC-HR-MS/MS, triple-quad LC-MS/MS, ESI/APCI triple quadrupole, liquid chromatography-tandem mass spectrometry, liquid chromatography mass spectrometry, liquid chromatography high-resolution tandem mass spectrometry, liquid chromatography-high resolution tandem mass spectrometry
LC-MS ist eine Analysemethode, die Flüssigchromatografie (LC) mit Massenspektrometrie (MS) verbindet, um Verbindungen in komplexen Proben zu identifizieren. Die Flüssigchromatografie trennt die gelösten Verbindungen einer Probe zeitlich auf. Die Massenspektrometrie misst anschließend das Masse-zu-Ladung-Verhältnis jeder Verbindung und ermöglicht so deren eindeutige Identifizierung.
LC-MS trennt Verbindungen und misst ihre Masse
Die Flüssigchromatografie (LC) leitet eine gelöste Probe durch eine Säule, in der verschiedene Verbindungen zu unterschiedlichen Zeitpunkten austreten. Sobald die getrennten Verbindungen die Säule verlassen, misst die Massenspektrometrie (MS) ihr jeweiliges Masse-zu-Ladung-Verhältnis und identifiziert sie anhand dieser eindeutigen Eigenschaft.
Bei der Prüfung von Peptiden und Forschungschemikalien liefert LC-MS drei zentrale Ergebnisse: Identität, Reinheit und Verunreinigungen. Standard-HPLC-Berichte beruhen auf UV-Lichterkennung, die unspezifisch ist: Sie zeigt nur, dass etwas vorhanden ist, aber nicht was. Verunreinigungen können sich in einem einzelnen Peak verbergen, wenn sie gemeinsam mit der Zielsubstanz austreten (koeluieren), wodurch eine unreine Probe rein wirkt. LC-MS verringert dieses Problem, weil es die tatsächliche Molekülmasse misst und so prüft, ob ein Peak eine verborgene Mischung aus Zielpeptid und Abbauprodukt enthält.
LC-MS hat klare Unterschiede und Grenzen
- Standard-HPLC wird häufig mit LC-MS verwechselt, ihr fehlt jedoch die Massenmessung zur eindeutigen Identitätsbestätigung.
- GC-MS verwendet Gas und testet auf flüchtige Restlösungsmittel statt auf intakte Peptide.
- ICP-MS misst elementare Schwermetalle.
- LC-MS/MS ist ein fortgeschrittener Aufbau, der das Molekül zusätzlich fragmentiert, um seine genaue Aminosäuresequenz auszulesen.
- LC-MS verifiziert nur das Molekül selbst. Biologische Sicherheitsrisiken wie Endotoxine werden damit nicht geprüft, sondern erfordern separate Tests.
Quellen
- Principles and Applications of Liquid Chromatography-Mass Spectrometry in Clinical Biochemistry - PMC
- Liquid Chromatography-High Resolution Mass Spectrometry for Peptide Drug Quality Control - PMC
- Characterization of Synthetic Peptide Therapeutics Using Liquid Chromatography-Mass Spectrometry: Challenges, Solutions, Pitfalls, and Future Perspectives - PubMed
- What Are the FDA Requirements for Peptide Characterization? -
- [PDF] Q2(R2) Validation of Analytical Procedures - FDA
- Analytical Procedures and Methods Validation for Drugs and Biologics
- Methods for analyzing peptides and proteins on a chromatographic timescale by electron-transfer dissociation mass spectrometry
- Validation of a liquid chromatography-high-resolution mass spectrometry method to quantify peptide-related impurities in teriparatide - PubMed
- Mass spectrometry-based multi-attribute method in protein therapeutics product quality monitoring and quality control - PMC
- Liquid Chromatography-High Resolution Mass Spectrometry for Peptide Drug Quality Control
- Identification and accurate quantification of structurally related peptide impurities in synthetic human C-peptide by liquid chromatography-high resolution mass spectrometry
- Performance metrics for evaluating system suitability in liquid chromatography--Mass spectrometry peptide mass mapping of protein therapeutics and monoclonal antibodies - PubMed
- Recent Advances in Liquid Chromatography–Mass ... - PMC
- Limitations of mass spectrometry-based peptidomic approaches
- HPLC vs LC-MS in Peptide Verification
- Liquid Chromatography Mass Spectrometry (LC-MS) Information | Thermo Fisher Scientific - IN
- HPLC vs Mass Spectrometry for Peptide Purity Testing: An Analytical Methods Guide