Peptidetesting

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Analytik

Ionenchromatographie

Ionenchromatographie ist eine Labortechnik, mit der elektrisch geladene Moleküle getrennt und gemessen werden. Bei der Peptidprüfung wird sie verwendet, um die Masse saurer Salze wie TFA zu messen, die am Pulver anhaften. Dadurch lässt sich die tatsächliche Menge des aktiven Peptids bestimmen.

Auch genannt: Ionen-Chromatographie, ion chromatography, IC, ion-exchange chromatography

Ionenchromatographie (IC) ist ein spezialisiertes HPLC-Verfahren, das geladene Moleküle trennt und dadurch kleine Ionen in einer Probe messbar macht. Diese Methode ermöglicht eine detaillierte Analyse der chemischen Zusammensetzung, was für die Qualitätskontrolle von Peptiden von zentraler Bedeutung ist.

Ionenchromatographie bestimmt Peptidgehalt und TFA-Konzentration

Die Ionenchromatographie misst in der Peptidprüfung vor allem ionische Verunreinigungen und Gegenionen wie Trifluoressigsäure (TFA) oder Chloride. Diese Salze binden sich während der Synthese an das Peptid und erhöhen das physische Gewicht des gefriergetrockneten Pulvers. Die IC-Analyse ist daher wichtig, um den tatsächlichen Peptidgehalt sowie die aktive Peptidmasse im Verhältnis zu den Restsalzen genau zu bestimmen.

Bei diesem Verfahren fließt eine flüssige Lösung durch eine Säule mit geladenem Material, in der ein Ionenaustausch stattfindet. Ein Suppressor entfernt dabei das elektrische Hintergrundrauschen, sodass ein Detektor die spezifischen Ionen beim Verlassen der Säule erfassen kann. Hohe TFA-Rückstände bedeuten für Dich, dass Du weniger aktives Peptid erhältst, als das Gesamtgewicht vermuten lässt.

Ionenchromatographie im Vergleich zu anderen Methoden

  • Ionenchromatographie misst Salze und Gegenionen, wahrend RP-HPLC die Reinheit des Peptids selbst bestimmt.
  • Ionenchromatographie quantifiziert Ionen, wahrend Mass Spectrometry die Identitat des Peptids bestatigt.

Quellen

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  2. [PDF] Analytical Procedures and Methods Validation for Drugs and Biologics
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  6. [PDF] Common Deficiencies Associated with Comparative Peptide ... - FDA
  7. [PDF] Q2(R2) Validation of Analytical Procedures - FDA
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  9. Determination of Counter Ions of Synthetic Peptides Using ...
  10. Ion chromatography - Wikipedia
  11. Ion Chromatography
  12. HPLC vs Mass Spectrometry for Peptide Purity Testing
  13. HPLC vs LC-MS in Peptide Verification
  14. Principles of Ion Exchange Chromatography | Phenomenex
  15. Ion Chromatography
  16. 01-00564-EN Determination of Counter Ions of Synthetic Peptides Using Ion Chromatograph
  17. Basic Principles of LC, HPLC, MS, & MS
  18. Advancing Pharmaceutical Analysis with Ion Chromatography