Síntese de peptídeos em fase sólida

A síntese de peptídeos em fase sólida (SPPS, do inglês solid-phase peptide synthesis) é um método de fabricação química introduzido por Bruce Merrifield em 1963. Ela constrói peptídeos ancorando a cadeia em crescimento a grânulos de resina insolúvel e, em seguida, adicionando aminoácidos um de cada vez. Como o peptídeo permanece no suporte sólido, o excesso de reagentes e subprodutos pode ser removido por meio de ciclos de lavagem. A SPPS é comumente automatizada, geralmente usa química baseada em Fmoc e funciona bem para sequências de até 50-60 aminoácidos de comprimento.

SPPS é o processo de fabricação, não um teste analítico

A SPPS é o método de produção empregado para criar peptídeos, não um teste que avalia sua qualidade. Erros de síntese são relevantes em relatórios de laboratório porque geram impurezas que os testes posteriores devem detectar. Acoplamento ou desproteção incompletos podem produzir peptídeos com deleção, ou seja, que carecem de um ou mais aminoácidos. Outros problemas incluem racemização, rearranjos de cadeias laterais, contaminação química e agregação em sequências mais longas.

Testes laboratoriais usados para avaliar os resultados da SPPS

• HPLC separa o peptídeo alvo dos subprodutos para medir a pureza.
• Espectrometria de massas verifica o peso molecular para confirmar a identidade do peptídeo.
• Análise de aminoácidos determina o teor líquido de peptídeo após considerar a água ou sais residuais.

Distinguindo SPPS de produtos analíticos e síntese em fase líquida

A SPPS não deve ser confundida com testes analíticos como HPLC ou espectrometria de massas. A SPPS cria o peptídeo, enquanto esses testes avaliam o produto final. Ela também é distinta da síntese de peptídeos em fase líquida ou em solução, na qual a cadeia peptídica é construída inteiramente em líquido, sem um suporte sólido.