Synthèse de peptides en phase solide
La synthèse peptidique en phase solide (SPPS) est une méthode de laboratoire qui permet de produire des chaînes peptidiques étape par étape sur des billes de résine solide. Ce n'est pas un test ; c'est le processus de production, tandis que les rapports de laboratoire ultérieurs analysent ses résultats pour en vérifier la pureté et l'identité.
Aussi appelé: solid-phase peptide synthesis
La synthèse peptidique en phase solide (SPPS) est une méthode de fabrication chimique introduite par Bruce Merrifield en 1963. Elle construit des peptides en fixant la chaîne en croissance à des billes de résine insolubles, puis en ajoutant les acides aminés un par un. Comme le peptide reste sur le support solide, les réactifs en excès et les sous-produits peuvent être éliminés par des cycles de lavage. La SPPS est généralement automatisée, utilise typiquement la chimie Fmoc et fonctionne bien pour des séquences allant jusqu'à 50-60 acides aminés de long.
La SPPS est le procédé de fabrication, pas un test analytique
La SPPS est la méthode de production utilisée pour créer des peptides, et non un test qui évalue leur qualité. Les erreurs de synthèse sont importantes dans les rapports de laboratoire car elles créent des impuretés que les tests ultérieurs doivent détecter. Un couplage ou une déprotection incomplets peuvent produire des peptides de délétion auxquels il manque un ou plusieurs acides aminés. D'autres problèmes incluent la racémisation, les réarrangements de chaînes latérales, la contamination chimique et l'agrégation dans les séquences plus longues.
Tests de laboratoire utilisés pour évaluer les résultats de la SPPS
- HPLC sépare le peptide cible des sous-produits pour mesurer la pureté.
- Spectrométrie de masse vérifie le poids moléculaire pour confirmer l'identité du peptide.
- Analyse des acides aminés détermine la teneur nette en peptides après prise en compte de l'eau ou des sels résiduels.
Distinguer la SPPS des produits analytiques et de la synthèse en phase liquide
La SPPS ne doit pas être confondue avec les tests analytiques comme l'HPLC ou la spectrométrie de masse. La SPPS crée le peptide, tandis que ces tests évaluent le produit final. Elle se distingue également de la synthèse peptidique en phase liquide ou en solution, où la chaîne peptidique est entièrement construite en milieu liquide sans support solide.