Síntesis de péptidos en fase sólida

La síntesis de péptidos en fase sólida (SPPS, por sus siglas en inglés) es un método de fabricación química introducido por Bruce Merrifield en 1963. Construye péptidos anclando la cadena en crecimiento a perlas de resina insolubles y luego agregando aminoácidos uno a la vez. Debido a que el péptido permanece en el soporte sólido, los reactivos en exceso y los subproductos se pueden eliminar mediante ciclos de lavado. La SPPS se automatiza comúnmente, suele usar química basada en Fmoc y funciona bien para secuencias de hasta 50-60 aminoácidos de longitud.

La SPPS es el proceso de fabricación, no una prueba analítica

La SPPS es el método de producción utilizado para crear péptidos, no una prueba que evalúe su calidad. Los errores de síntesis son relevantes en los informes de laboratorio porque generan impurezas que las pruebas posteriores deben detectar. El acoplamiento o la desprotección incompletos pueden producir péptidos por deleción que carecen de uno o más aminoácidos. Otros problemas incluyen racemización, reordenamientos de cadenas laterales, contaminación química y agregación en secuencias más largas.

Pruebas de laboratorio utilizadas para evaluar los resultados de la SPPS

• HPLC separa el péptido objetivo de los subproductos para medir la pureza.
• Espectrometría de masas verifica el peso molecular para confirmar la identidad del péptido.
• Análisis de aminoácidos determina el contenido neto de péptido después de considerar el agua o las sales residuales.

Diferenciar la SPPS de los productos analíticos y la síntesis en fase líquida

La SPPS no debe confundirse con pruebas analíticas como la HPLC o la espectrometría de masas. La SPPS crea el péptido, mientras que esas pruebas evalúan el producto final. También es distinta de la síntesis de péptidos en fase líquida o en solución, donde la cadena peptídica se construye completamente en líquido sin un soporte sólido.