Espectrometria de massas
A espectrometria de massas (MS) é uma técnica analítica que identifica uma molécula medindo sua relação massa-carga. Em testes de peptídeos e substâncias químicas de pesquisa, ela confirma a identidade - ou seja, responde "o que é essa molécula?" -, e não a pureza.
Também chamado de: mass spectrometry
A espectrometria de massas (MS) é um teste analítico que identifica um composto medindo as massas de seus íons e comparando a massa observada com a massa esperada. Para peptídeos, a ionização é comumente realizada por eletrospray (ESI), uma técnica que aplica uma carga elétrica às moléculas sem fragmentá-las.
As três etapas da análise por espectrometria de massas
- A amostra é convertida em partículas carregadas chamadas íons.
- Os íons são separados por campos elétricos ou magnéticos de acordo com sua relação massa-carga (m/z).
- Um detector conta os íons e produz um espectro de massas.
Por que a espectrometria de massas e a HPLC são ambas necessárias para a verificação de peptídeos
A espectrometria de massas confirma a identidade de um composto, enquanto a HPLC mede o quão puro esse composto é. Como esses dois métodos respondem a perguntas fundamentalmente diferentes, a verificação completa de peptídeos exige ambos. Uma amostra pode ter 99% de pureza por HPLC e ainda assim ser o composto completamente errado, pois a HPLC não consegue distinguir substâncias com comportamento cromatográfico semelhante.
Por outro lado, a espectrometria de massas confirmando a massa correta não prova que a amostra é majoritariamente aquele composto, já que uma impureza não relacionada ainda pode dominar. Você deve notar que a "pureza por MS" tipicamente reflete a intensidade relativa dos íons, em vez de uma medição quantitativa validada, e geralmente é uma evidência mais fraca do que a porcentagem de área da HPLC. Nem a espectrometria de massas nem a HPLC detectam riscos de segurança, como endotoxinas bacterianas.