Espectrometría de masas
La espectrometría de masas (MS) es una técnica analítica que identifica una molécula midiendo su relación masa-carga. En las pruebas de péptidos y sustancias químicas de investigación, confirma la identidad -es decir, responde "¿qué es esta molécula?"-, no la pureza.
También llamado: mass spectrometry
La espectrometría de masas (MS, por sus siglas en inglés) es una prueba analítica que identifica un compuesto midiendo las masas de sus iones y comparando la masa observada con la masa esperada. Para los péptidos, la ionización se realiza comúnmente mediante electrospray (ESI), una técnica que aplica una carga eléctrica a las moléculas sin romperlas.
Las tres etapas del análisis por espectrometría de masas
- La muestra se convierte en partículas cargadas denominadas iones.
- Los iones se separan mediante campos eléctricos o magnéticos según su relación masa-carga (m/z).
- Un detector cuenta los iones y genera un espectro de masas.
Por qué se requieren tanto la espectrometría de masas como la HPLC para la verificación de péptidos
La espectrometría de masas confirma la identidad de un compuesto, mientras que la HPLC mide su pureza. Dado que ambos métodos responden preguntas fundamentalmente distintas, la verificación completa de un péptido exige los dos. Una muestra puede presentar un 99% de pureza por HPLC y, no obstante, ser el compuesto completamente equivocado, ya que la HPLC no puede distinguir sustancias con comportamiento cromatográfico similar.
Por el contrario, que la espectrometría de masas confirme la masa correcta no demuestra que la muestra consista mayoritariamente en ese compuesto, pues una impureza no relacionada podría seguir siendo dominante. Debes considerar que la "pureza por MS" refleja generalmente la intensidad relativa de los iones, no una medición cuantitativa validada, y suele constituir una evidencia más débil que el porcentaje de área de la HPLC. Ni la espectrometría de masas ni la HPLC detectan riesgos de seguridad como las endotoxinas bacterianas.