Peptidetesting

Retour au glossaire

Analyse

HPLC

La HPLC (chromatographie liquide à haute performance) est une méthode de laboratoire utilisée pour séparer, identifier et mesurer les composants individuels d'un mélange liquide. C'est la principale méthode pour tester la pureté des peptides et des produits chimiques de recherche.

Aussi appelé: HPLC

La HPLC est une méthode de chimie analytique qui sépare les molécules d'un échantillon liquide en fonction de leurs propriétés chimiques. Cette technique produit un chromatogramme, un graphique utilisé dans les rapports de laboratoire pour enregistrer et interpréter les substances détectées lors des tests.

Le processus de séparation par HPLC utilise une haute pression

Le processus HPLC fonctionne en pompant un solvant liquide à haute pression à travers une colonne remplie d'un matériau solide. Lorsqu'un échantillon est injecté, ses composants interagissent différemment avec le matériau solide, ce qui les fait se déplacer à des vitesses différentes. À mesure que chaque composant sort de la colonne, un détecteur le mesure pour créer le chromatogramme final.

  • Confirmation de l'identité : Le temps qu'une substance met à sortir de la colonne est comparé à un standard connu pour vérifier son identité.
  • Mesure de la pureté : Le détecteur compare le composé cible aux impuretés pour générer un score de pureté en pourcentage de surface, par exemple 98 % pur. Cela indique que l'échantillon contient très peu de sous-produits indésirables ou de matériaux de dégradation.

La HPLC et la spectrométrie de masse ont des rôles différents

La HPLC est souvent confondue avec la spectrométrie de masse (MS) dans les rapports de laboratoire, mais les deux méthodes fournissent des informations différentes. La HPLC détermine la pureté en mesurant la quantité d'une substance présente, tandis que la spectrométrie de masse identifie la substance par son poids moléculaire. Étant donné que la HPLC seule peut passer à côté d'impuretés cachées, les laboratoires combinent souvent les deux méthodes en un seul test LC-MS.