Peptidetesting

Zurück zum Glossar

Analytik

Karl Fischer titration

Die Karl-Fischer-Titration ist eine Labormethode, mit der die Wassermenge in einer Probe genau bestimmt wird. Bei Peptiden ist diese Messung wichtig, weil überschüssige Feuchtigkeit dazu führen kann, dass Peptide abgebaut werden. Nicht berücksichtigtes Wasser kann außerdem die wahrgenommene Reinheit eines Produkts fälschlich höher erscheinen lassen.

Auch genannt: Karl-Fischer-Methode, Karl-Fischer-Bestimmung, KF-Titration, Karl Fischer, KF

Die Karl-Fischer-Titration (KF-Titration) ist eine analytisch-chemische Methode, die den exakten Wassergehalt einer Probe misst. Die Reaktion läuft in einer geschlossenen Zelle ab, in der Wasser mit Iod, Schwefeldioxid, einer Base und einem Alkohol reagiert. Für höheren Wassergehalt verwenden Labore die volumetrische KF-Titration, für Spurenmengen die coulometrische Variante.

Bedeutung für Laborberichte und Analysezertifikate

Die KF-Titration liefert den Wassergehalt, den Du brauchst, um die tatsächliche Reinheit eines Peptids richtig einzuordnen und sein Haltbarkeitsrisiko durch Feuchtigkeit einzuschätzen. Lyophilisierte, also gefriergetrocknete Peptide können Restfeuchtigkeit enthalten. Labore müssen den Wassergehalt kennen, um die "wasser-korrigierte Reinheit" zu berechnen: Ein Peptid mit angegebener Reinheit von 98 %, das 5 % Wasser enthält, hat einen tatsächlichen Peptidgehalt von nur 93,1 %. Hohe Feuchtigkeit beschleunigt außerdem den Abbau während der Lagerung und kann dadurch Sicherheit und Wirksamkeit beeinträchtigen.

Grenzen und häufige Verwechslungen der KF-Titration

  • Die KF-Titration misst ausschließlich Wasser und erfasst keine anderen Substanzen.
  • Der Trocknungsverlust (LOD) ist ein physikalischer Gewichtsverlusttest, der auch verdampfende Lösungsmittel oder Fette erfasst.
  • Die HPLC-"Reinheit" misst relative Signale statt absoluter Masse und zeigt daher nicht, wie viel Peptid tatsächlich enthalten ist.
  • Die KF-Titration quantifiziert streng genommen nur Wasser und identifiziert weder das Peptid noch seine nichtflüchtigen Verunreinigungen.

Quellen

  1. Reference Standards to Support Quality of Synthetic Peptide Therapeutics
  2. Comparison of Oven-drying Methods for Determination of Moisture Content in Feed Ingredients - PMC
  3. Water Determination by Karl Fischer Titration
  4. Automated moisture analysis in pharmaceutical peptides | Metrohm
  5. [PDF] <921> WATER DETERMINATION
  6. Xylem Analytics | Water Determination Karl Fischer
  7. What Is Karl Fischer Titration?
  8. Introduction
  9. Method Development and Method Validation for Residual Water Determination of Erythropoietin Pharmaceutical Formulations by Volumetric Karl Fischer Titration | International Journal of Public Health and Health Sciences
  10. Verification of a compendial method: Water Determination by Karl Fischer Titration
  11. Suitability Test for Water Determination by Volumetric Karl Fischer Titration
  12. Karl Fischer Titration – Moisture Analysis
  13. Karl Fischer titration - Wikipedia
  14. Karl Fischer vs. Loss-On Drying - Which Method is the Best?
  15. Karl Fischer titration: When to use volumetry or coulometry | Metrohm
  16. USP <921> Water Determination Methods | PDF | Titration | Chemistry
  17. usp31nf26s1_c921, General Chapters: <921> WATER DETERMINATION
  18. Water Determination by Karl Fischer - Eurofins Scientific