Monitoreo de Reacciones Múltiples
MRM (monitoreo de reacciones múltiples) es un método de espectrometría de masas dirigido que verifica si una molécula específica conocida está presente en una muestra y mide cuánta hay, usando dos rondas de filtrado de masas para alta especificidad.
También llamado: Multiple Reaction Monitoring
El Monitoreo de Reacciones Múltiples (MRM, por sus siglas en inglés), también denominado Monitoreo de Reacciones Seleccionadas (SRM), constituye un modo de escaneo dirigido de espectrometría de masas en tándem (MS/MS) empleado en instrumentos de triple cuadrupolo. En los informes de laboratorio o Certificados de Análisis (COA), el MRM se utiliza para confirmar la identidad de una sustancia conocida específica y cuantificar su concentración. Se aplica ampliamente a la medición de péptidos, proteínas, fármacos, hormonas y toxinas ambientales, a menudo en combinación con cromatografía líquida (LC-MS/MS).
Cómo el MRM utiliza filtros de masa duales para lograr alta especificidad
El MRM alcanza una alta especificidad mediante la aplicación secuencial de dos filtros de masa independientes. Esto confiere a la señal una precisión superior a la de la espectrometría de masas de una sola etapa, ya que contribuye a distinguir la sustancia objetivo del ruido de fondo o de moléculas de aspecto similar. El par específico de precursor a fragmento se denomina transición MRM. Dado que el MRM es un método dirigido, el laboratorio debe conocer la masa de la molécula y su comportamiento de fragmentación antes de iniciar la prueba.
El flujo de trabajo del MRM consta de tres etapas:
- Q1 (primer filtro de masa) selecciona la molécula objetivo por su masa.
- Q2 (celda de colisión) fragmenta la molécula en piezas más pequeñas.
- Q3 (segundo filtro de masa) selecciona un fragmento específico para su detección.
Limitaciones del MRM en las pruebas generales de pureza
El MRM no constituye un análisis de pureza general y no detectará sustancias que no haya sido programado específicamente para encontrar. No identifica impurezas no programadas. En consecuencia, un porcentaje de pureza típicamente no puede determinarse únicamente con MRM y requiere métodos ortogonales adicionales. Para descubrir impurezas desconocidas, el enfoque analítico más adecuado es la LC-HRMS no dirigida.