Peptidetesting

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Analyse

Surveillance de réactions multiples

Le MRM (Multiple Reaction Monitoring) est une méthode de spectrométrie de masse ciblée qui vérifie si une molécule spécifique connue est présente dans un échantillon et en mesure la quantité, en utilisant deux étapes de filtrage de masse pour une spécificité élevée.

Aussi appelé: Multiple Reaction Monitoring

La surveillance de réactions multiples (MRM), également désignée sous le terme de surveillance de réaction sélectionnée (SRM), constitue un mode de balayage ciblé en spectrométrie de masse en tandem (MS/MS) sur les instruments à triple quadripôle. Dans les rapports de laboratoire ou les certificats d'analyse (COA), la MRM est employée pour confirmer l'identité d'une substance spécifique connue et quantifier sa concentration. Elle est largement utilisée pour mesurer les peptides, les protéines, les médicaments, les hormones et les toxines environnementales, souvent couplée à la chromatographie liquide (LC-MS/MS).

Comment la MRM utilise des filtres de masse doubles pour une spécificité élevée

La MRM atteint une spécificité élevée en appliquant deux filtres de masse indépendants en séquence. Ce procédé rend le signal plus précis que la spectrométrie de masse à un seul étage, car il aide à distinguer la substance cible du bruit de fond ou de molécules similaires. La paire précurseur-fragment spécifique est dénommée transition MRM. Étant donné que la MRM est ciblée, le laboratoire doit connaître préalablement la masse et le comportement de fragmentation de la molécule avant de débuter le test.

Le flux de travail MRM comporte trois étapes :

  1. Q1 (premier filtre de masse) sélectionne la molécule cible par sa masse.
  2. Q2 (cellule de collision) fragmente la molécule en morceaux plus petits.
  3. Q3 (deuxième filtre de masse) sélectionne un fragment spécifique pour la détection.

Limites de la MRM dans les tests de pureté généraux

La MRM n'est pas un test de pureté général et ne détectera pas les substances qu'elle n'a pas été spécifiquement programmée pour trouver. Elle n'identifie pas les impuretés non programmées. Par conséquent, un pourcentage de pureté ne peut généralement pas être déterminé par la MRM seule et nécessite des méthodes orthogonales supplémentaires. Pour découvrir des impuretés inconnues, la LC-HRMS non ciblée est l'approche analytique la plus appropriée.