GC-MS
La GC-MS (chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse) est une technique d'analyse en deux étapes qui sépare les composés chimiques volatils et thermostables, puis les identifie par leur masse moléculaire et leur motif de fragmentation. Elle convient aux petites molécules volatiles, mais pas aux peptides intacts, car la chaleur les détruit généralement avant la mesure.
Aussi appelé: GC-MS
La GC-MS (chromatographie en phase gazeuse-spectrométrie de masse) est une méthode d'analyse combinée qui sépare et identifie les substances chimiques dans un échantillon. La chromatographie en phase gazeuse (GC) sépare un mélange en ses composants individuels. La spectrométrie de masse (MS) identifie ensuite chaque composant par sa masse moléculaire et son schéma de fragmentation. Ensemble, la GC-MS indique quelles substances sont présentes et fournit une estimation approximative de leur quantité.
Analyse GC-MS en deux étapes : séparation et identification
Le processus se déroule en deux étapes. D'abord, l'étape de GC vaporise l'échantillon et le fait passer dans une colonne capillaire chauffée avec un gaz inerte. Les composés se déplacent à des vitesses différentes selon leur volatilité et leur polarité, puis quittent la colonne à des temps de rétention caractéristiques.
Ensuite, chaque composé séparé entre dans le spectromètre de masse. Là, il est ionisé et fragmenté en particules chargées. L'instrument mesure leur rapport masse/charge et produit un spectre de masse, qui fonctionne comme une empreinte moléculaire. Les pics, les spectres et les aires des pics aident à lire le résultat : le nombre de pics permet d'évaluer la pureté, le spectre confirme l'identité, et l'aire des pics suggère la concentration.
GC-MS pour les rapports de laboratoire : forces et limites pour l'analyse des peptides
- La GC-MS est performante pour les petites molécules volatiles et thermostables, comme les solvants résiduels ou les polluants environnementaux, où elle peut montrer la composition et des quantités approximatives.
- Elle est peu adaptée à l'analyse de peptides intacts car les peptides sont généralement gros, polaires et thermiquement instables, donc la chaleur d'injection peut les détruire avant la mesure.
- Les seules données de GC-MS ne suffisent pas à prouver l'identité ou la pureté d'un peptide intact ; la LC-MS, la HPLC et la RMN restent les principales méthodes à cet effet.
- Les méthodes basées sur la GC peuvent aider dans certains travaux limités sur les peptides, comme l'analyse des acides aminés après hydrolyse, mais ces approches détruisent la structure peptidique intacte.